MTT檢測技術(shù)服務(wù)

MTT細(xì)胞活性檢測服務(wù)

四甲基偶氮唑鹽比色法（MTT方法），是通過快速簡便的顏色反應(yīng)來檢測細(xì)胞存活數(shù)量。其原理是MTT可作為哺乳類動物細(xì)胞線粒體中琥珀酸脫氫酶的底物。當(dāng)有活細(xì)胞存在時，線粒體內(nèi)琥珀酸脫氫酶可將淡黃色的MTT還原成藍(lán)紫色的針狀甲月替（Formazan）結(jié)晶并沉積在細(xì)胞中，結(jié)晶物能被二甲基亞砜 （DMSO）溶解,用酶聯(lián)免疫檢測儀在570nm波長處測定其吸光度OD值，OD值的高低可間接反映活細(xì)胞的數(shù)量及其活性。

MTT法常用的研究：

1、檢測細(xì)胞活性：常作為細(xì)胞毒性試驗的一種方法。

2、體外藥物敏感實驗：該方法簡便、經(jīng)濟、快速，重復(fù)性好，所需的細(xì)胞數(shù)較少，沒有放射性，目前廣泛的用于臨床前的抗癌藥物的篩選研究。

3、一些細(xì)胞因子活性的研究

實驗步驟:

1）將對數(shù)生長期細(xì)胞用胰酶消化后配制成濃度為1-10×104個/ml的細(xì)胞懸液，按1000-10000個細(xì)胞/孔接種于96孔板，每孔加100μl。

2）將平板置37℃、 5%CO2濕度培養(yǎng)箱中24小時后，加入含有不同濃度受試樣本的培養(yǎng)液100μl，每個樣本不同濃度設(shè)平行的三個孔，對照組加不含樣本的培養(yǎng)液100μl，再放入培養(yǎng)箱中孵育24-72 小時，

3）用快速翻板法倒掉培養(yǎng)液，每孔加入用無血清1640按5mg/ml新鮮配制的MTT溶液100μl，溫育4小時，使MTT還原為甲 月替，再次倒掉上清液，每孔加DMSO（二甲基亞楓）200μl，用平板搖床搖勻后，使用酶標(biāo)儀測定光密度值（OD）（參考波長450nm，檢測波長570nm），以溶劑對照處理細(xì)胞為對照組，按下述公式計算化合物對細(xì)胞的抑制率，并按中效方程計算半數(shù)抑制濃度IC50：

客戶方需提供:

樣本描述,相關(guān)的實驗設(shè)計內(nèi)容如作用時間和樣本濃度等。

公司方提供：

實驗結(jié)果IC50值。

實驗周期與費用：

實驗費用以樣本數(shù)和細(xì)胞株的種類數(shù)目為單位計算，實驗周期為18個工作日，公司將在材料和預(yù)付的實驗經(jīng)費全部到位后25個工作日之內(nèi)提交實驗結(jié)果。客戶需在收到實驗結(jié)果后一周內(nèi)付清所有剩余款項。